產品介紹：
NATE是InvivoGen設計的一種核酸轉染增強劑，可以提高難轉染細胞的瞬轉與穩轉效率，尤其適合人的單核細胞與小鼠巨噬細胞等難轉染的細胞，如外周血單核細胞（THP-1）和小鼠單核巨噬細胞白血病細胞（RAW 264.7），且只需在平時加轉染試劑操作前30min加入NATE即可。值得注意的是，NATE對細胞溫和，不會對細胞培養產生任何進一步的毒性。
在真核細胞轉染過程中，外源性核酸(如質粒)的主要障礙是會被胞質感測器檢測，如cGAS/STING、AIM2炎性小體和LC3介導的自噬。這些防禦訊號級聯的啟用常常會降低轉染率和細胞存活率，特別是在難以轉染的細胞(如免疫細胞)中會更明顯。當使用NATE時，這些核酸感測通路將被抑制，從而在轉染過程中保護質粒並促進其表達。
產品特色：
與常用轉染試劑 (e.g. GeneXPlus, Lipofectamine LTX, and jetPRIME) 及物理方法相容。
更高的轉染率，也適用於大質粒 (> 10kb)。
在所有的轉染測試方案中都顯示對細胞溫和，沒有毒性。
產品資訊：
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Product Name |
Unit Size |
Cat. code |
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NATE |
1 mL (100 reactions) |
lyec-nate |
應用舉例
利用GeneXPlus將GFP標記的質粒(3kb)瞬時轉染到THP-1細胞中，48小時後，熒光顯微鏡下觀察，使用NATE後轉染效率明顯增加。
利用GeneXPlus、Lipofectamine LTX、jetPRIME、nucleofection等常用轉染方法，將~3kb質粒(左)和~8kb質粒(右)瞬時轉染至THP-1細胞。48小時後，用流式細胞術檢測轉染效率，與不使用NATE轉染相比，資料有明顯差異變化。
詳細說明
在真核細胞轉染過程中，“外來”核酸(如質粒DNA)的主要障礙是它們自身被胞質核酸感測器檢測到，如黑色素瘤缺乏因子2 (AIM2)和環GMP-AMP合成酶(cGAS)介導的自噬。
AIM2是一種細胞質感測器，與雙鏈DNA (dsDNA)結合後，會形成一種稱為炎性小體的蛋白質複合物。最終，促炎症細胞因子IL-1β和IL-18的成熟需要透過相應的AIM2 炎症小體的形成和半胱天冬氨酸蛋白水解酶1（caspase-1）的活化來完成。這些細胞因子的產生不利於轉染成功。
cGAS能識別dsDNA，並透過STING/TBK1/IRF3訊號軸誘導I型干擾素(IFNs)的產生，以及一些干擾素刺激基因(ISGs)的表達，這些強大的效應功能，在轉染中是非常多餘的。
此外，STING的啟用不依賴於TBK1-和INF，就可以導致LC3相關的自噬。最終，自噬體將形成包含“外來”核酸(如質粒)的形式，並與溶酶體融合在細胞中降解。
