正在墨西哥進行HEP DART 2021大會上，研究人員帶來了一項基於ARCUS平臺開發的PBGENE-HBV基因編輯候選藥物臨床前完整試驗資料。本屆HEP DART 2021大會開始及結束時間為2021年12月5日至9日。
乙肝在研新藥PBGENE-HBV，臨床前資料，在HEPDART2021大會發布
一、研究背景
研究人員介紹，乙肝病毒是一個全球主要的健康問題，已有超過2.5億人存在慢性HBV感染。急性HBV感染後，5%至10%的成年人和高達90%的幼兒，因為無法產生足以清除感染的免疫反應，隨後發展成為慢性乙肝（CHB）病毒感染。目前的HBV療法可以減緩疾病進展，但無法消除共價閉合環狀DNA（cccDNA），因此需要環狀接受終身治療。
研究人員假設核酸酶介導的雙鏈斷裂可能導致cccDNA降解或產生突變無法複製的cccDNA，這兩種結果都可能導致免疫抑制性HBV蛋白、乙肝表面抗原（HBsAg）的減少。在HEP DART 2021大會上，我們描述了一種使用工程ARCUS 核酸酶（稱為 HBV-POL）靶向 cccDNA 中的 HBV 聚合酶基因的潛在治癒性治療方法。
二、研究方法
使用測定的活性和特異性在體外進行核酸酶表徵，如確定的分別透過目標編輯百分比和全基因組、無偏寡核苷酸捕獲分析。使用 HBV 感染的原代人肝細胞 (PHH) 模型，我們能夠透過 Southern 印跡評估 cccDNA 水平、NGS 編輯 cccDNA、qPCR 檢測細胞外 HBV DNA 和免疫分析 (CLIA) 檢測 HBV sAg 水平來確定核酸酶的效力。
整合目標序列的編輯是透過分析來自 HepG2 衍生細胞系的插入缺失和 HBsAg 減少來進行的，該細胞系包含 1 個部分 HBV 基因組的整合併產生 HBsAg。為了在體內測試我們的基因編輯方法，研究人員還利用了一個 AAV 模型，其中游離型 AAV 作為 cccDNA 的替代物，並透過含有 HBV-POL 核酸酶 mRNA 的脂質奈米粒子 (LNP) 系統地遞送我們的核酸酶。研究人員已經在小鼠中評估了該模型，並將其應用於一種新型的非人類靈長類動物 (NHP) 模型。
三、研究結果
結果表明，HBV-POL 核酸酶經過五輪最佳化設計，產生了高度特異性和活性的靶向 HBV 的核酸酶。在轉染以表達 HBV-POL 核酸酶的 HBV 感染的原代人肝細胞中，實現了cccDNA、分泌的HBV DNA和 HBsAg 的顯著減少。在治療的小鼠中使用含有 LNP 的 HBV-POL 核酸酶 mRNA，研究人員檢測到 AAV 複製減少了 60%，高達 86%在剩餘的 AAV 中插入缺失，並且在單次 LNP 給藥後血清 HBsAg 持續降低 96%。
在 NHP 中，研究人員間隔約 6 周施用兩次 LNP，並在每次 LNP 劑量後觀察漸進式編輯，最終實現 AAV 複製減少 70% 和平均 34% 插入缺失。然而，儘管使用了免疫抑制方案，HBsAg 從迴圈中清除，阻止其用作NHP 中 HBV-POL 活性的生物標誌物。
四、研究結論
綜上所述，研究人員給出結論，我們開發了一種使用 ARCUS 核酸酶 HBV-POL 的基因編輯方法，該方法對 cccDNA 中的 HBV 聚合酶基因具有高靶向活性和特異性，並顯示出在 HBV 感染的 PHH 中體外編輯和降解 cccDNA 的能力。此外，在小鼠和 NHP 中由治療相關的 LNP 遞送的 HBV-POL 核酸酶可有效切割和降解遊離型 AAV，用作 HBV cccDNA 的替代物。總之，這些資料支援用於消除 cccDNA 和潛在治癒 HBV 感染的基因編輯方法。
小番健康結語：PBGENE-HBV，是一款由臨床階段生物公司（Precision BioSciences）基於ARCUS平臺開發的基因編輯在研乙肝新藥，在HEP DART 2021大會上，研究人員帶了以上關於該候選藥物的完整臨床前資料。科學家對該候選藥物的臨床前進展評價，將在下一篇繼續介紹。
