細胞鋪板是細胞實驗中最常見又必須掌握的一門技術，看似簡單，然而卻經常遇到如細胞居中或者中間稀疏等不均勻分佈的現象，結果就是隻能整板扔掉，重新鋪板，既耽擱時間又浪費了細胞及培養板等資源。歷經多次失敗後，你才會發現，原來細胞鋪板是有規律可循的，今天我們就聊一聊：細胞鋪板的3種手法。
首先，我們來看看細胞鋪板不均勻的3種最常見情況：
1，中間多，周圍少
2，中間少，四周多
3，呈現一坨一坨的狀態
這麼多種不均勻的情況，到底該怎麼拯救呢？一起來看看細胞鋪板的三種手法：
手法一：均勻單層
要鋪成那種很均勻的單層細胞，手法如下：
1，細胞板子先加入一定量(一般是總量培養基的1/5)的培養基，放入孵箱中放置10-20min。
2，在滴入細胞時，細胞板子與通風櫥有一定的角度，沿著板壁的孔邊緣滴入。
3，滴入後，呈“8”字方法搖晃5-8次。
4，置於水平臺上，放置10-20分鐘
5，放入孵箱。在細胞鋪板時，每一種板子的孔面積有多大，培養的液體量以及加入細胞量如下：
手法二：中間少，周圍多
其實細胞鋪板不一定都需要單個單個的那麼均勻，比如，做免疫熒光時，我們會更喜歡鋪中間少，周圍稍多的板子，
因為這個樣子可以同時檢測到單個細胞的形態，另外又可以照一點低倍的用作於統計，所有的細胞都在一個環境中。
特別說明一下：這裡的多也只是相對於多，細胞也是單層的。
中間
周圍
要鋪這樣的細胞樣子，那鋪細胞時要注意手法了：1，細胞板子不需要提前用培養基潤洗，直接從邊上滴入混有細胞的培養基。
2，放置30s-1min後，前後搖晃5-8次。
3，放在水平臺上靜置2-5min。
4，放入孵箱。
手法三：中間多，周圍少
學一般在提取蛋白或者提取RNA的時候，可以這樣鋪板，因為有些細胞刮刀不好用，沒有辦法刮到周圍的。想要鋪中間多，周圍少的板子，手法如下：
1，細胞板子不需要提前潤洗，從中間滴入進去後。
2，把板子朝一個方向順時針或者逆時針旋轉3-5圈。
3，水平臺上靜置2-5min。
4，放入孵箱。
總結一下：想要細胞鋪板鋪得好，背景知識很重要其實在鋪細胞的時候，你要準確的知道你所養的細胞的特性，比如：
1，細胞的名稱，來源。
2，細胞的屬性。
3，細胞分裂時間。還有，最主要的是要搞清楚你的細胞的生長曲線，還要知道鋪板後多久可以到達什麼細胞密度。
如果你準確的掌握了你的細胞特性，那鋪板是分分鐘搞定的事情。
細胞鋪板後，細胞狀態不好怎麼辦？
如果出現這種情況，我們建議你從以下幾個方面考慮一下原因：
1，用來鋪板的細胞狀態本身就不好。
2，用來鋪板的細胞傳代次數太多，有些老化。
3，胰酶消化時間過長。
4，中和的血清量及時間不夠。
5，支原體汙染。細胞鋪板是一個經驗積累的過程，你的手法也需要積極的改進，不要生搬硬套，也不要一味追求絕對的鋪均勻，在實驗過程中多思考細胞本身的特徵和屬性，出現問題積極解決即可。
