將一片西紅柿葉子在滴管裡擠出汁液，並適當加水稀釋，然後輕輕放入一片試紙條，大約10秒之後，該紙條上清晰地出現了兩道暗紅色的橫條，這是該葉子感染了番茄褐色皺果病毒（tomato brown rugose fruit virus，簡稱ToBRFV）的標誌。
這一幕是在山東農業大學植物病毒學研究室發生的。近日，科技日報記者來到該實驗室時，實驗室負責人、植物病毒學專家李向東教授告訴記者：“這是我們實驗室剛剛製備的番茄褐色皺果病毒試紙條。相對於其它檢測手段，它靈敏度高、特異性強、使用方便、操作簡單，非常適合田間大批次樣品檢測，對病毒的精準監測及早期預警有重要作用。”
番茄褐色皺果病毒是一種新發病毒，可透過種子、接觸以及熊蜂傳播，嚴重威脅番茄的安全生產。ToBRFV首先報道於約旦、以色列，隨後相繼在美洲、歐洲、非洲等國家出現，引起國際上廣泛重視，多個國家將其列入檢疫物件。
今年4月9日，我國農業農村部和海關總署聯合釋出的《中華人民共和國進境植物檢疫性有害生物名錄》也將ToBRFV列為檢疫物件。
快速鑑定及早期預警對ToBRFV的防治十分關鍵。目前的ToBRFV檢測方法包括多重PCR、熒光定量等，均需要精密儀器或專業的操作人員。而李向東實驗室研製的膠體金免疫試紙條操作簡單，可在幾秒或者幾分鐘內透過肉眼觀察進行判斷，對於田間檢測十分適用。
據李向東介紹，他們實驗室以ToBRFV粒子為免疫原，透過雜交瘤技術製備了17株抗ToBRFV的單抗，將2個單抗分別固定於膠體金墊和硝酸纖維素膜上進行組合，製備膠體金試紙條，獲得272個配對組合。透過特異性測定，篩選到一組配對抗體制備的試紙條。試紙條可從稀釋12800倍的番茄葉片病汁液中（含約8微克番茄葉片）檢測到ToBRFV，快速而且靈敏，而與其它同屬菸草花葉病毒屬、氨基酸一致率超過85%、同樣侵染番茄的番茄斑駁花葉病毒、番茄花葉病毒等毫無反應。
“我們同時在辣椒上做了實驗，結果同樣理想。目前，該成果已經申請國家發明專利，並被山東、河北、河南、江蘇、安徽等地農技推广部門和企業試用。”李向東說。（王延斌 翟榮惠）
來源：科技日報
