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捕獲抗體和標記抗體可以互換嗎?

在免疫IVD中,抗體是主要的原料。選擇合適的配對抗體或篩選抗體對是試劑研發中重要的一環。那麼我們篩選下來的抗體對可以互換位置嗎?

  • 通常來說, Coating Ab的量基本是比較固定的(上限200ng/well左右), target的濃度在液相中通常不會很高,pg-ng/mL水平, 就需要detection Ab具有很強的能力捕獲下來。 然後detection Ab的壓力就小很多了, 反正target都已經在板子上了,區域性濃度很高,而且detection Ab的濃度可以搞到很高, 即使親和力低點,你把它濃度搞高一些,這個結合通常不會有什麼問題。大部分情況下不能互換,是侷限在coating Ab的要求比較高, 你把它拿去做detection是沒有問題的, 但是你很難找到一個好的coating Ab。
  • 另外有些抗體不能標記,主要原因是CDR上有lysine 參與了抗原的結合,那麼修飾就可能破壞結合,或者產生空間位阻。但是比例不足矣大到解釋不能反的比例, 因為通常你會發現,你反過來把capture Ab標記一下,它識別抗原還是不錯的。 另外,也有很多是不需要標記detection antibody的,這時候你依然會發現不能反。

捕獲抗體和標記抗體可以互換嗎?

捕獲抗體和標記抗體可以互換嗎?

分類: 科學
時間: 2021-10-12

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