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miR-206調控小細胞肺癌幹細胞EVI1基因表達及細胞生物學行為

摘要:

文題釋義:

miRNA-206:定位於人類第6號染色體上,最早從骨骼肌中發現,它參與人體中一系列的生物學過程例如細胞增殖、組織器官的生長及腫瘤的發生等。最近大量研究顯示miR-206在腫瘤細胞中表達失調,在腫瘤的生長、增殖、凋亡及侵襲、轉移、耐藥中發揮重要作用。

EVI1:EVI1基因定位於人染色體3q26上,能夠與多種重要基因的啟動子DNA序列進行有效結合,進而調控基因的轉錄。EVI1位點可產生剪下變異,與其他基因產生融合。EVI1在正常人骨髓和外周血細胞中均不表達,但在部分惡性腫瘤,如胃癌、白血病中可高表達。

背景:透過對小細胞肺癌體外分選鑑定,可以發現腫瘤幹細胞的存在是促使腫瘤細胞惡性增殖的重要因素。腫瘤的發生與細胞內多種分子的異常表達以及靶向基因的調控障礙密切相關。前期研究發現,EVI1具備原癌基因特性,在肺癌中其表達上調。miR-206可靶向調控EVI1基因和蛋白的表達。

目的:探討miR-206靶向調控EVI1轉錄基因的表達對小細胞肺癌幹細胞增殖和分裂週期的影響。

方法:首先採用miR-206轉染實驗驗證靶向調控EVI1基因,實驗分3組:miR-206 mimics組、miR-206 inhibitor組和miR-NC組,分別轉染小細胞肺癌幹細胞,Western blot法檢測細胞中EVI1蛋白的表達。然後採用慢病毒干擾法下調小細胞肺癌幹細胞中miR-206表達驗證細胞的訊號轉導通路和生物學行為,實驗分3組:pLB-miR-206組、空載體組和對照組,RT-PCR法檢測細胞中miR-206和EVI1 mRNA表達水平,Western blot法檢測p-Akt和p-JNK蛋白表達,MTT法檢測細胞增殖活性,流式細胞術檢測細胞週期中分裂細胞和凋亡細胞的百分比。

結果與結論:①miR-206 mimics組Evi1蛋白水平顯著高於miR-NC組(P < 0.05),miR-206 inhibitor組Evi1蛋白水平顯著低於miR-NC組(P < 0.05),提示miR-206可能靶向調控小細胞肺癌幹細胞EVI1基因的表達;②經miR-206慢病毒轉染後,pLB-miR-206組miR-206和EVI1 mRNA表達水平明顯低於空載體組和對照組,p-Akt和p-JNK蛋白表達水平下降,細胞增殖率減少,分裂細胞比例下降(P < 0.05),提示miR-206可能透過靶向調控小細胞肺癌幹細胞中EVI1基因的表達和Akt/JNK訊號通路的啟用,對細胞增殖和分裂週期產生影響。

https://orcid.org/0000-0002-6372-3500(王繼芳)

中國組織工程研究雜誌出版內容重點:幹細胞;骨髓幹細胞;造血幹細胞;脂肪幹細胞;腫瘤幹細胞;胚胎幹細胞;臍帶臍血幹細胞;幹細胞誘導;幹細胞分化;組織工程

關鍵詞: 幹細胞, 腫瘤幹細胞, 肺癌幹細胞, 小細胞肺癌, miR-206, EVI1基因, 訊號通路, 增殖, 細胞週期

引用文字:王繼芳, 鮑 禎, 喬亞紅. miR-206調控小細胞肺癌幹細胞EVI1基因表達及細胞生物學行為[J]. 中國組織工程研究, 2022, 26(7): 1075-1079.

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miR-206調控小細胞肺癌幹細胞EVI1基因表達及細胞生物學行為

分類: 歷史
時間: 2021-11-01

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