微源實驗室利用HPLC圖譜分析茶皂素黃酮苷組分

黃酮苷屬黃酮類，是一種茶多酚物質。黃酮類化合物是存在於自然界的、具有2-苯基色原酮結構的化合物。其羥基衍生物多具黃色,故又稱黃鹼素或黃酮。目前黃酮類化合物的檢測多以系統溶劑分離法或是柱層析法等作為主要實驗方法。微源實驗室查閱文獻資料，利用HPLC/MS分析方法以日常中茶麩茶皂素為例實驗了黃酮苷組分的檢測。

將茶麩用正己烷溶劑脫脂，乾燥粉碎後取用適量，加入120％(W/W)的乙醇溶液浸取，液泵迴圈1.5h左右濾出溶劑，重複操作浸提3次合併濾液，得皂素液。將皂素液與萃取劑在分液漏斗中混合，振搖10min，靜置分層。分離乾燥後得到樣品，準確稱量2.0mg樣品用1ml色譜純MeOH溶解過濾待進樣檢測。按照表格條件得到茶皂素HPLC分析圖譜如下：

從分析圖譜來看，峰1和峰2峰面積較大，推測為主要的黃酮苷成分，可以將這兩種主要黃成分分離並分別收集，採用紫外吸收結合香草醛顯色，判斷確認這兩個峰是黃酮苷類化學成分。分離純化後的均為純的化合物，無雜峰出現，得到2種黃酮苷的HPLC分析圖譜。

利用HPLC對樣品進行分析，達到分離技術條件，再以HPLC/MS分析確定化合物的分子量等結構確認資訊，不僅可以判斷分子離子峰，還可以在黃酮苷類化合物中較快地看出糖的個數及糖分子量，整個實驗過程重複性好得到資料精密度高，各項組分的檢測結果符合標準。