摘要：
文題釋義：
髓源性生長因子(myeloid-derived growth factor，MYDGF)：是一種由骨髓單核細胞和巨噬細胞分泌的細胞因子，可以改善糖尿病小鼠的胰島素抵抗和葡萄糖/脂質代謝。髓源性生長因子可以改善血管內皮功能障礙，並且在改善心肌梗死方面發揮重要作用。
髓源性生長因子和ApoE雙基因敲除模型建立：購買骨髓特異性髓源性生長因子基因敲除小鼠和ApoE基因敲除小鼠，將兩種小鼠進行雜交得到ApoE基因敲除小鼠骨髓特異性髓源性生長因子缺失小鼠，利用基因鑑定和蛋白水平驗證敲除效果，初步觀察敲除小鼠表型。
背景：目前關於髓源性生長因子(myeloid-derived growth factor，MYDGF)與動脈粥樣硬化及代謝性疾病的研究較少，因此建立一種載脂蛋白E(apolipoprotein E，ApoE)敲除骨髓MYDGF缺失的小鼠模型對於研究MYDGF與動脈粥樣硬化疾病的關係尤為重要。
目的：建立ApoE敲除骨髓MYDGF特異性缺失小鼠模型並進行鑑定。
方法：ApoE敲除小鼠和骨髓特異性MYDGF敲除小鼠，均購於上海南方模式生物科技股份有限公司。選取5只ApoE敲除小鼠與10只骨髓特異性MYDGF敲除小鼠進行交配，得到基因型為MYDGFflox/+ApoEflox/+ F1子代小鼠30只，MYDGFflox/+ApoEflox/+互相進行交配，一共得到基因型為MYDGFflox/floxApoEflox/flox雙敲除小鼠30只和ApoEflox/flox小鼠子代小鼠34只。採用PCR法進行MYDGFflox及ApoEflox基因型鑑定，記錄MYDGFflox/floxApoEflox/flox雙敲除小鼠與ApoEflox/flox小鼠2月齡的體長及體質量，採用Western blotting和免疫熒光檢測2組小鼠骨髓組織MYDGF蛋白相對錶達量，油紅O染色檢測2組小鼠胸主動脈斑塊面積。實驗方案經中國人民解放軍中部戰區總醫院動物實驗倫理委員會批准。
結果與結論：①得到基因型為ApoEflox/flox小鼠共34只、MYDGFflox/floxApoEflox/flox小鼠共30只，2組小鼠體長、體質量比較差異均無顯著性意義(均P > 0.05)；②MYDGFflox/floxApoEflox/flox小鼠骨髓組織MYDGF蛋白相對錶達量顯著低於ApoEflox/flox小鼠(P < 0.05)；③MYDGFflox/floxApoEflox/flox小鼠胸主動脈的斑塊面積百分比顯著大於ApoEflox/flox小鼠(P < 0.05) ；④結果證實成功敲除了ApoE小鼠的MYDGF基因，說明成功構建ApoE敲除骨髓特異性MYDGF缺失小鼠模型，並經基因型及蛋白組織水平鑑定；MYDGF基因缺乏可以加重ApoE基因敲除小鼠的動脈粥樣硬化。
https://orcid.org/0000-0002-2356-9924 (丁燕)
中國組織工程研究雜誌出版內容重點：組織構建；骨細胞；軟骨細胞；細胞培養；成纖維細胞；血管內皮細胞；骨質疏鬆；組織工程
關鍵詞: 骨髓細胞, MYDGF基因, ApoE基因, MYDGF蛋白, 雙基因敲除, 小鼠
引用本文: 丁 燕, 向光大, 孟碧瑩, 徐曉麗, 陳月富. 建立載脂蛋白E基因敲除小鼠骨髓髓源性生長因子缺失模型及鑑定[J]. 中國組織工程研究, 2022, 26(14): 2196-2201.
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