細胞搖瓶培養技術是實驗室常用的通風培養方法,透過裝有液體培養物的瓶子放在搖床上振盪培養,以滿足微生物生長、繁殖及產生許多代謝產物對氧的需求,是實驗室摸索工藝條件的常用方法。枯草芽孢桿菌發酵培養實驗,也是選用的這種方式。
枯草芽孢桿菌發酵培養實驗的材料包括:枯草芽孢桿菌、種子培養基、發酵培養基、恆溫搖床、無菌吸管、試管、三角瓶、發酵罐等。從試管菌種開始,透過逐級擴大增加培養物,使用機械攪拌罐發酵枯草芽孢桿菌。工藝流程包括:試管斜面菌種(12 h,37℃)→接種(1環菌苔)→搖瓶種子培養液中,250 mL三角瓶振盪培養(12 h,37℃)→種子培養液,接種(1%-5%)→機械攪拌發酵罐發酵。
細胞搖瓶在枯草芽孢桿菌發酵培養中作為細胞生長的耗材使用。作為一種懸浮細胞培養容器,它需要滿足無DNA酶/RNA酶的要求,為了方便觀察培養基的容量,在瓶身還帶有模製的刻度。
在枯草芽孢桿菌發酵培養實驗中,試管接細胞搖瓶之前,搖瓶培養基要設平板劃線空白對照,以確認搖瓶種子培養基是否滅菌徹底。種子培養液接發酵罐之前,要對種子培養液進行鏡檢,檢查是否由雜菌汙染。