原位雜交技術(In situ hybridization,ISH)是分子生物學、組織化學及細胞學相結合而產生的一門技術,主要是利用核酸分子單鏈之間鹼基序列的互補,將有放射性或非放射性的外源核酸(即探針)與組織、細胞或染色體上待測DNA或 RNA互補配對,結合成專一的核酸雜交分子,經一定的檢測手段將待測核酸在組織、細胞或染色體上的位置顯示出來,可以在細胞標本或組織標本上進行。
主要包含以下四種技術:
1. 基因組原位雜交技術(GISH)
2.熒光原位雜交技術(FISH)
3.多彩色熒光原位雜交技術(mFISH)
4.原位PCR(In situ PCR)
原位雜交技術的一般過程:
以經過標記的已知核酸分子為探針
以細胞內與探針序列互補的特異核酸分子為靶分子
在一定條件下使探針與靶核酸分子在原位發生雜交
探測
實驗過程中關鍵因素:
雜交液、探針濃度、溫度、溼度、pH、時間
應用:
1. 細胞特異mRNA轉錄的定位,用於基因圖譜、基因表達和基因組進化的研究
2. 感染組織中病毒DNA/RNA的檢測和定位
3. 癌基因、抑癌基因和各種功能基因在轉錄水平的表達和變化的檢測
4. 基因在染色體上的定位和檢測染色體的變化
5. 間期細胞遺傳學的研究
6. 疾病的基因變化的研究
TDH-500原位雜交儀
TDH-500原位雜交儀可以根據實驗者的設定,自動完成變性和雜交過程。該系統一次可處理12張玻片。全密封式上蓋設計和全自動的加溼方法保證了理想的溫度和溼度,為實驗提供了可靠的保證。玻片很容易用手取出或放入,利用觸控式螢幕可以簡單快速的編輯個使用者定義方案和4種操作模式:變性/雜交、雜交、自定義模式以及原位PCR實驗模式。
產品特點
程式化操作,保證實驗結果更準確
1. 一次可進行12張切片的實驗,良好的密封性和全自動的加溼方法保證樣本的最佳溫度和溼度
2. 有99個使用者程式和3種操作模式,適合各種原位雜交實驗
使用者程式設定
1.變性/雜交、雜交、自定義模式以及原位PCR實驗四種操作模式
2. 觸控式螢幕操作,簡單易行,顯示屏隨時顯示實驗條件,實驗過程一目瞭然
精確的溫度控制和溼度控制
1. 快速升降溫,溫度從37℃升至95℃僅需3分鐘,95℃降到45℃僅需7分鐘
2. 溫度的良好均勻性
3. 最佳化的溫度/溼度控制,系統完美的密封型,即保證了溫度控制也保證了溼度控制
技術引數
