細胞培養是生物醫學研究的常見操作，其中避免細菌汙染是重要一環。對於生命科學實驗室，早期就檢查培養細胞中是否存在細菌汙染，對於解決細胞汙染問題，是一個合理的選擇。
據估計，高達5%的細胞培養物發生過細菌汙染，並且缺乏肉眼可見的細菌汙染跡象，如渾濁、培養基突然變色(酚紅)或出現微生物顆粒。此外，細菌可對標準抗生素(如青黴素/鏈黴素)表現出耐藥性，並直接影響細胞代謝、生長和分化。因此，採用一款快速、靈敏、可靠的細菌檢測試劑盒，就顯得尤為必要。
德國MB公司專門設計的細菌PCR檢測Kit可以直接檢測細胞培養、細胞培養衍生的生物製劑和細胞培養基中的細菌汙染。下面小編介紹一下。
描述
該試劑盒採用PCR方法，用於檢測生物樣品（包括細胞培養物和病毒貯存液）中是否存在細菌。
該試劑盒針對細菌16S rRNA基因高度保守區。根據序列一致性，可至少檢測汙染細胞常見的45種細菌屬，具體如下：
放線菌Actinomyces
芽孢桿菌Bacillus
腸球菌Enterococcus
埃希氏桿菌Escherichia
梭菌Fusobacterium
克雷伯氏菌Klebsiella
乳酸桿菌Lactobacillus
微球菌Micrococcus
分枝桿菌Mycobacterium
假單胞菌Pseudomonas
卟啉單胞菌Porphyromonas
普氏菌Prevotella
沙門氏菌Salmonella
沙雷氏菌Serratia
軍團菌Legionella
葡萄球菌Staphylococcus
鏈球菌Streptococcus
消化鏈球菌Peptostreptococcus
該試劑盒靈敏度達到100個基因組複製/PCR反應。
說明：該試劑盒只用於科研，不用於工業QC。
試劑盒包括：
凍幹型PCR mix：含引物/核苷酸/內控對照DNA /熱啟動聚合酶；
復溶緩衝液；
凍幹型陽性對照DNA；
PCR級水。
樣本處理
樣本不用提DNA，只需熱滅活（95 °C 5分鐘）；
樣本需不含抗生素，如含抗生素，則細胞應在不含抗生素的培養基中培養至少一代後再檢測。
反應體系
25μl反應體系：含20 μl PCR Mix和5μl模板。
結果判定
PCR結束後在瓊脂糖電泳上跑膠。典型結果如下圖所示。
圖. 電泳分析結果。左側為內控對照條帶，在140bp，用於排除假陰性。如有內控條帶，則顯示PCR反應正常，樣本中無PCR抑制成分。右側為目的條帶，在467bp左右。如有目的條帶，則提示有細菌汙染。
產品引用文獻
Simonsen Ø. et al., (2015). Characterization of the exte nt of a large outbreak of Legionnaires‘ disease by serological assays. BMC Infectious Diseases, 15:163. doi: 10.1186/s12879-015-0903-2.
